Культуральне дослідження

Відео: Культуральний метод дослідження. I етап Отримання ізольованого росту

Культуральне дослідження є високочутливим і специфічним методом лабораторної діагностики мікозів. Його необхідно проводити незалежно від результатів мікроскопії, так як культуральний метод дозволяє іноді виявляти збудника при негативних даних мікроскопіі- він дає можливість визначати рід і вид збудника і, отже, проводити адекватну терапію і профілактику захворювання. Особливо корисний культуральний метод для діагностики латентних форм мікозів, носійства дерматофитов здоровими людьми.

Перед посівом патологічного матеріалу його розщеплюють на предметному склі на дрібні шматочки, 5 - 6 з них переносять на поверхню косого агару і розташовують на відстані 1 - 2 см один від іншого. Матеріалом однієї проби засівають не менше 2 - 3 пробірок (волосся) або 4 - 5 пробірок (шкірні та нігтьові лусочки). Для первинної ізоляції дерматофитов найкраще придатні стандартна агар-зірованним середовище Сабуро з 2 - 4% глюкози або сусло-агар, що містять антибіотики (пеніцилін 50 мкг / мл + стрептоміцин або біоміцин (50 мкг / мл і 200 мкг / мл відповідно) і антідрожжевой антибіотик актідон (ціклогексамід) 0,1 - 0,5 мг / мл. Актідон не впливає на зростання дерматофітів і пригнічує багато цвілеві гриби, а також види Candida і Cryptococcus [Аравійський Р. А., Горшкова Г. І., 1995].



Посів роблять у боксі над полум`ям газового або спиртового пальника платинової петлею, мікологічним гачком або лопаткою з ніхрому. Тримаючи пробірку в лівій руці, охоплюють її над полум`ям пальника, захоплюючи пробку мізинцем правої руки, якою одночасно тримають петлю. Прокаленную до червоного петлю остуджують і одночасно зволожують дотиком до поверхні середовища в стороні від місця передбачуваного посіву. Потім беруть частку матеріалу і наносять на поверхню агару. Пробірку закривають пробкою, попередньо обпаленої над полум`ям. Так само роблять пересів з пробірки в пробірку.

Аналогічним чином проводять посів на чашку Петрі. Необхідно, щоб наявна в ній середовище як можна менше стикалася з оточуючим повітрям, тому кришку слід піднімати настільки, щоб в неї вільно могла пройти тільки петля з патологічним матеріалом.

Посіви інкубують при 22 - 30 ° С (краще всього 28 ° С). Поява зростання дерматофітів відзначається з 4-го по 12-й день інкубації в точках посіву по краях внесеного матеріалу. При відсутності росту протягом 30 днів результати культивування вважаються негативними. В оптимальних умовах первинні культури багатьох дерматофитов можна ідентифікувати на 7 - 10-й день після посіву, але стежити за посівами потрібно протягом 20 - 30 днів. Первинні культури ростуть порівняно повільно, при появі зростання в первинним посіві необхідно провести відсів від краю колонії на свіжу диференціальну середу для отримання чистої культури, яка буде служити матеріалом для ідентифікації виділеного дерматофіти.lt; lt; ПопереднєНаступна gt; gt;

Увага, тільки СЬОГОДНІ!