Мікроскопічне дослідження

Відео: мікроскопічне дослідження давньоєгипетської пелени

Мікроскопічне дослідження патологічного матеріалу на гриби виробляють в нативних і забарвлених препаратах. Для приготування нефарбованих препаратів отриманий матеріал подрібнюють за допомогою скальпеля або препаровальной голки і поміщають на середину предметного скла. Для більш чіткого виявлення елементів гриба виробляють просвітлення (мацерацию) матеріалу. З цією метою вдаються до допомоги різних речовин, найчастіше їдкого лугу (КОН, NaOH), які розчиняють епідермальні лусочки, слиз, гній, прояснюють пігмент волоса і тим самим роблять гриби доступними для дослідження.

На розм`якшені лусочки шкіри або нігтя, які поміщають на середину предметного скла, наносять 1-3 краплі 20 - 30% розчину КОН (NaOH). Досліджуваний матеріал в краплях лугу обережно підігрівають над полум`ям спиртівки до появи ніжного білого обідка з кристалів лугу по периферії краплі. Підігрівати до кип`ятіння не слід. Після підігрівання краплю накривають покривним склом, уникаючи попадання бульбашок повітря. Підігрівання препаратів після накладення покривного скла не рекомендується. Приготовлені препарати тривалого зберігання не підлягають. Їх найкраще досліджувати протягом 2 годин з моменту приготування, так як після цього настає глибоке руйнування тканин або випадають кристали лугу. Р. А. Аравійський і Г. І. Горшкова (1995) рекомендують просвітлені і накриті покривним склом препарати шкірних лусочок і волосся залишати на 5 - 10 хв, а нігтьових пластинок - на 30 - 40 хв до микроскопирования.

Просвітлення препаратів можна проводити без підігрівання, для цього їх залишають в 20% розчині КОН на 30 - 60 хв або використовують інші методи просвітлення патологічного матеріалу: хлораллактофенолом по Аману- лактофенолом- розчином, що містить по 15% диметилсульфоксиду і КОН у воді. Хороші результати отримують після просвітління нігтьових пластинок, поміщених в 5% розчин КОН на 24 год, підігрівання в цьому випадку не потрібно.

Мікроскопічне дослідження виробляють на звичайному лабораторному мікроскопі без іммерсіі. Конденсор мікроскопа повинен бути опущений, діафрагма звужена. На початку препарат знаходять на склі при малому збільшенні (40х), подальше дослідження проводять при більшому збільшенні (100х) - детально препарат вивчають при збільшенні 400х. Необхідно досліджувати кілька препаратів з тим, щоб збільшити надійність аналізу і уникнути хибнопозитивних результатів.



Помилки в мікроскопічній діагностиці грибів можуть виникнути в зв`язку як з дефектами приготування препарату, так і з недостатньою досвідченістю лаборанта.

Дефекти виготовлення насамперед бувають пов`язані з перегріванням препарату, що може призвести до випадання кристалів лугу, руйнування волоса і появи дрібнозернистого розпаду в патологічному матеріалі. Лінійне розташування подовжених рівних кристалів лугу вельми нагадує нитки септірованного міцелію навіть на чистому склі без патологічного матеріалу. Крім того, велика кількість кристалів лугу перешкоджає виявленню гриба в глибоко лежачих шарах патологічного матеріалу. Диференційно-діагностичними ознаками є виключне одноманітність кристалів, їх склоподібна прозорість, багатогранність країв і відсутність нерозривному зв`язку одного елемента з іншим. У сумнівних випадках рекомендується додати до препарату крапельки злегка підігрітою дистильованої води, які швидко розчиняють кристали лугу.

За елементи гриба помилково можуть бути прийняті крапельки жиру, бульбашки повітря, бавовняні нитки одягу і так званий «мозаїчний грибок».

Ліпіди шкірних покривів, жирової розпад клітин і зерна кератогиалина, особливо мають правильну форму, можуть нагадувати окремі суперечки гриба. Але різноманітність форми і, головне, розмірів, відсутність внутрішньої структури утворень (вакуолі, оболонки) говорять проти грибкової природи даних елементів. Ліпіди також можуть потрапити в препарат при взятті патологічного матеріалу з недостатньо очищеного осередку ураження.

Бульбашки повітря можуть нагадувати суперечки дріжджоподібних клітин, але на відміну від останніх вони оточені щільною темною оболонкою, і навіть найменші бульбашки повітря завжди більше клітин гриба.

Нитки від тканини шкарпеток, одягу і т. П. Зазвичай лежать окремо від патологічного матеріалу, вони завжди більше гифов, грубіше і не септірованного.

«Мозаїчна грибок» являє собою артефакт, який виникає в процесі кристалізації (можливо, за рахунок розпаду холестерину). Він має вигляд сіточки або петель, обриси яких відповідають межам рогових лусочок, на відміну від ниток міцелію він ніколи не перетинає стінки клітин епідермісу.

У деяких лабораторіях просвітлення препаратів для мікроскопічного дослідження проводять 15 - 30% розчином КОН, в який додають 5 - 10% комерційних темно-синіх чорнил фірми Паркер (Parker`s Superchrome Blue-Black Ink). При цій забарвленням гіфи і суперечки фарбуються в блакитний колір.lt; lt; ПопереднєНаступна gt; gt;

Увага, тільки СЬОГОДНІ!