Визначення видової приналежності м`яса тварин і птиці

Відео: Terr queos (Earthlings-2005) (Multi-subtitles)

Видову приналежність м`яса домашніх, диких тварин і птиці встановлюють для вирішення питань, пов`язаних з судово

ветеринарної експертизою у випадках підміни м`яса одного іншим (фальсифікація), браконьєрства, розкрадань.

Існують орієнтовні і достовірні (точні) метод] визначення видової приналежності м`яса.

Орієнтовними є: точка плавлення і застивг жиру досліджуваного м`яса, йодне число, щільність, коефіцієнт пре ломленія- наявність (якісна реакція) і концентрація Глік гена в м`язовій тканині, органолептичні показники жиру і м`яса .:

Достовірними (точними) методами визначення видової приналежності м`яса вважають постановку реакції преципітації (ПРК наявності гіперімунна сироваток) і особливості анатомічне! го будови кісток скелета (при їх наявності).

Деякі фізико-хімічні показники різних видів харчових пряжених жирів наведені в табл. 13.

Таблиця 13

Відео: Воїн сучасності: Даміан Мандер на TEDxSydney

Визначення температури плавлення жиру. В чистий сухий скляний капіляр діаметром 1,4-1,5 мм набирають розплавлений і профільтрована жир досліджуваного зразка. Довжина стовпчика жиру в капілярі має бути близько 20 мм. Капіляр для повного застигання жиру в ньому витримують 1-2 ч в побутовому холодильнику або на льоду. Після охолодження кінець капілярної трубки, заповнений жиром, відрізають (відламують), залишаючи стовпчик жиру довжиною не менше 5 мм. Капіляр прикріплюють гумовим колечком до хімічного термометру таким чином, щоб кінець його, наповнений жиром, був повернутий догори, а вільний від жиру - вниз. Термометр з капіляром поміщають в пробірку (діаметр 20-25 мм) і закріплюють в ній за допомогою пробки з отвором для термометра. Термометр не повинен торкатися стінок пробірки. Пробірку закріплюють в штативі, опускають в стакан з водою, при цьому рівень води в склянці повинен бути вище верхнього кінця капіляра. Воду в склянці повільно нагрівають і на темному тлі через лупу спостерігають за показанням термометра і станом жиру в капілярі. Показання термометра в той момент, коли жир почне стікати по капіляри і в його верхній частині утворюється вільний простір, зазначають як температуру плавлення жиру. Визначення проводять двічі і результатом вважають середнє арифметичне двох випробувань, вони не повинні відрізнятися більш ніж на 0,5 ° С.

Визначення температури застигання жиру. Температурою застигання називається найбільш висока, що залишається короткий час постійної температура під час переходу жиру з рідкого стану в твердий. Температура застигання залежить від хімічного складу жиру і використовується не тільки для оцінки ступеня чистоти жирів, але і для орієнтовного визначення видової приналежності. Випробуваний жир розплавляють на водяній бані, фільтрують, висушують і наливають в пробірку. Температура жиру повинна бути на 12-15 ° С вище передбачуваної температури застигання. Пробірку закривають пробкою, в яку вставлений термометр зі шкалою, розділеної на п`яті або десяті частки градуса. Термометр зміцнюють так, щоб його ртутна кулька знаходився в середині жирового шару і не стикався зі стінками і дном пробірки.

Пробірку зміцнюють в горлі скляної банки, щоб вона не стосувалася дна- банку занурюють в посудину з водою і льодом.

Розплавлений жир перемішують термометром до його рівномірного охолодження. Після втрати прозорості жиру термометр залишають у спокої і через кожні 2 хв відзначають падіння температури.

З моменту кристалізації жиру падіння температури сповільнюється, потім може триматися на одному рівні або трохи збільшуватися і знову падати. Оскільки жири не є чистими речовинами, температура застигання їх нестійка.

Максимальний показ термометра, що спостерігається при кристалізації жиру, приймають за температуру його застигання.

Визначення коефіцієнта заломлення (рефракції) жиру. Досліджуваний жир повинен бути в рідкому стані, тому щільні тваринні жири розплавляють. Визначення проводять за допомогою різних рефрактометрів. Светопреломляющие властивості (рефракція) жиру залежать від кількості містяться в ньому тригліцеридів, граничних і ненасичених жирних кислот.

Спочатку рефрактометр встановлюють по дистильованої воді (п = 1,333). Коефіцієнт заломлення жиру знаходять при температурі, близької до температури його плавлення. Якщо температура плавлення вище 20 ° С, то коефіцієнт заломлення перераховують за формулою п 20 ° С = п + (ТС - 20 ° С) • 0,00035, де п 20 ° С - коефіцієнт заломлення при 20 ° С п - коефіцієнт заломлення при досліджуваній температурі-(ТС - 20 ° С) - різниця температур- 0,00035 - постійна величина.

На нижню призму рефрактометра наносять краплю досліджуваного жиру. Освітлювачем направляють пучок світла в освітлювальну призму. Через окуляр ведуть спостереження.

Встановлюють розподіл шкали, через яке проходить кордон світлотіні, - це і буде коефіцієнт заломлення досліджуваного жиру.

Визначення йодного числа жиру. За величиною цього показника судять про переважання в жирі граничних або ненасичених жирних кислот. Чим більше в жирі міститься ненасичених жирних кислот, тим вище його йодне Число.

Тугоплавкі жири мають низьке йодне число, легкоплавкі жири - висока, отже, по величині йодного числа можна орієнтовно визначити його видову приналежність.

Реакція на глікоген. У дозрілому м`ясі різних тварин глікоген міститься в таких кількостях: яловичина - 0,2-0,3% (приблизно така ж кількість в баранині і свинині), конина - близько 1,0 м`ясо собаки - близько 2,0 м`ясо кішки - близько 0,5%. Тому якісну реакцію на глікоген використовують для відмінності баранини від м`яса собаки, конини від яловичини.

Хід визначення: навішення м`яса (15 г) подрібнюють ножицями, переносять в колбу і додають 60 мл дистильованої води. Проба м`яса може бути більше або менше, але співвідношення м`яса до води

має бути 1: 4. Вміст колби доводять до кипіння і кип`ятять протягом 30 хв. Бульйон фільтрують через паперовий фільтр і охолоджують.

У пробірку наливають 5 мл фільтрату і додають 5-10 крапель люголевого розчину. При позитивній реакції бульйон забарвлюється в вишнево-червоний колір, при негативній - в жовтий, при сумнівною - в помаранчевий.

М`ясо собаки, коні, верблюда, ведмедя, кішки в більшості випадків дає позитивну реакцію на глікоген (екстракт з м`яса кішки може давати сумнівну реакцію).

М`ясо вівці, кози, великої рогатої худоби, кролика і свині на глікоген дає негативну реакцію.

Слід мати на увазі, що м`ясо молодих тварин усіх видів дає позитивну реакцію на глікоген, м`ясо ж старих і хворих тварин, а також взяте з області голови, шиї, як правило, дає на глікоген негативну реакцію.

Реакція преципітації. Заснована на випаданні білкового осаду під впливом Преципітуючих сироватки на відповідний антиген. Це найбільш точний метод для встановлення видової приналежності м`яса. Цим методом можна визначити видову приналежність м`яса, якщо воно навіть було піддано посолу або тепловій обробці.

Для постановки реакції необхідно мати набір відповідних преципитирующих сироваток, а також нормальну сироватку крові тварин різних видів. Їх виготовляють в Санкт-Петербурзькому науково-дослідному інституті вакцин і сироваток і висилають споживачам на вимогу з оплатою післяплатою. Цри тривалому зберіганні під сироватки подслаівают хлороформ і розливають їх у склянки з притертими пробками. Попередньо встановлюють титр преципитирующих сироваток і визначають їх специфічність.

Титр Преципітуючих сироватки перевіряють так. Нормальну сироватку певного виду тварини інактивують при температурі 56 ° С протягом 30 хв від неспецифічних антитіл. Потім розводять фізіологічним розчином 1: 100, 1: 1000, 1: 5000 і 1: 10000 залежно від титру, вказаного на етикетці ампули з в.ідоспеці "-фіческой Преципітуючих сироваткою.

У уленгутовскіе пробірки піпеткою переносять по 0,9 мл нормальної сироватки кожного розведення. Потім в кожну пробірку пастерівської піпеткою подслаівают по 0,1 мл Преципітуючих сироватки. Подслаівать можна однією пастерівської піпеткою починаючи з максимального розведення сироватки.

Придатної для дослідження вважається та Преципітуючих ротика, яка в розведенні 1: 10000 осаджує білок сироватки Вотня того ж виду протягом 10 хв і не дає осаду з Сивоя ми інших видів тварин в розведенні 1: 10000 протягом години

Готують екстракт з досліджуваного м`яса. Пробу досліджуваного ретельно звільняють від жиру і сполучної тканини, крейда подрібнюють і поміщають в пробірку- туди ж доливають фізіолlt; ня розчин так, щоб він покрив м`ясо шаром в неяк: мм. Пробірку струшують. Сире м`ясо екстрагують протягом ч, варене і засушене - до 1 доби. Після цього екстракт відсмоктують і фільтрують до прозорості через паперовий фільтр. Концен трація білка в екстракті повинна дорівнювати приблизно 1: 1000, що встановлюють наступним чином: скляний капілля- довжиною близько 10 см опускають в екстракт, і останній в силу до * піллярності піднімається по трубці (не до кінця). Потім той капіляр вносять похило в концентровану азотну кислоту, налиту на годинне скло. Азотна кислота так само, як і ек Ракта, входить в капіляр. На місці зіткнення рідин капілярі утворюється осад білка у вигляді білого кільця. Якщо осад виходить густий і масивний, то екстракт потрібно вагу фізіологічним розчином і пробу повторити ще раз. Так по- | ступають до тих пір, поки біле кільце згорнутого білка не станд немає ледь помітним. Повна відсутність осаду при постановці капілярної проби вказує на те, що концентрація білка в екстракті менш 1: 1000. З таким екстрактом реакцію ставити можна, так як титр преципитирующих сироваток вище, ніж 1: 1000.

Для постановки реакції преципітації готують кілька (4-7) рядів дрібних пробірок, по три пробірки в ряду. У перші пробірки кожного ряду наливають по 0,9 мл екстракту з досліджуваного м`яса-під другі - по 0,9 мл фізіологічного розчину і в треті - такий же обсяг нормальних сироваток різних тварин в розведенні 1: 1000.

У всі три пробірки першого ряду подслаівают різними пастерівськими пипетками по 0,1 мл сироватки, Преципітуючих білок корови, в пробірки другого ряду - по 0,1 мл сироватки, Преципітуючих білок коні, в пробірки третього ряду - по 0,1 мл Преципітуючих свинячий сироватки , в пробірки інших рядів -по такій же кількості овечої, козячої, собачої сироваток.

Реакцію читають на темному тлі. Позитивною реакцію вважають при появі на місці зіткнення рідин мутно-білого кільця протягом перших хвилин після додавання Преципітуючих сироватки. Реакція буде своєрідною, якщо мутно-біле кільце з`явиться протягом 1 год після додавання до екстракту Преципітуючих сивороткі- опади, що утворилися пізніше, вважають неспецифічними.

Позитивна реакція в першій і третій пробірках одного ряду показує, що досліджуване м`ясо належить тварині, якому відповідав би специфічність сироватки. У всіх інших рядах в перших пробірках реакція повинна бути негативною. А по-третє пробірках - позитивної. По-друге пробірках всіх рядів (контрольна проба з фізіологічним розчином) реакція повинна бути негативною.

Наприклад, якщо досліджувана витяжка виявилася приготовленої з м`яса коня, то результат реакції у всіх пробірках повинен бути наступним (табл. 14).

Таблиця 14

Визначення видової приналежності м`яса за результатами реакції преципітації

Відео: Про співпрацю Россільгоспнагляду з Мінсільгосппродом Білорусі

Б. С. Сенченко і Н. Н. Гугушвили розробили новий спосіб отримання преципитирующих сироваток для визначення видової приналежності м`яса домашніх і диких тварин, що включає підшкірні і внутрішньом`язові ін`єкції антигена (цільна кров) лабораторному тварині (кролики) з подальшим взяттям крові у того ж тваринного для отримання преципітуючих сироватки. Цільну кров ін`єктували підшкірно через 5 діб в кількості 0,2-0,3, 0,4-0,5, 0,6-0,7, 0,8-0,9 мл і в подальшому внутрішньом`язово по 1,0 1,2 мл через кожні 5 діб. Після останньої ін`єкції не раніше ніж через 10 діб беруть кров із серця імунізованих кролика. Починаючи з другої ін`єкції за 1,5-2 год до введення повної дози крові кроликам підшкірно вводили по 0,2 мл тієї ж крові для профілактики анафілактичного шоку.lt; lt; ПопереднєНаступна gt; gt;

Увага, тільки СЬОГОДНІ!